Procedura de colectare și procesare a sângelui din cordonul ombilical

Sângele din cordonul ombilical reprezintă o sursă valoroasă de celule stem hematopoietice și mezenchimale, recoltate imediat după naștere. Această lucrare explică pas cu pas cum se recoltează, procesează, crioprezervă și stochează sângele și țesutul cordonului ombilical, ce metode de procesare sunt utilizate, ce riscuri pot apărea și de ce alegerea unei metode de procesare adecvate (reducerea volumului și eliminarea globulelor roșii) este esențială pentru viabilitatea și siguranța probelor.

Ce este sângele din cordonul ombilical și ce conține?

Odată ce copilul este născut și cordonul ombilical este tăiat, o cantitate mică de sânge rămâne în vasele placentei și în secțiunea de cordon ombilical. Acest surplus de sânge, cunoscut sub numele de sânge placentar sau sânge din cordonul ombilical, nu mai este necesar pentru bebeluș după naștere. Sângele din cordonul ombilical cuprinde componentele esențiale ale sângelui, inclusiv globule roșii, globule albe, trombocite și plasmă, și conține celule stem hematopoietice responsabile pentru generarea celulelor sanguine.

De ce se recoltează și se stochează?

Sângele din cordonul ombilical are potențialul de a fi utilizat pentru transplanturi de celule stem în managementul a peste 70 de boli, incluzând leucemia, limfoame, anemii ereditare (de exemplu talasemie, anemie cu celule secera) și afecțiuni care necesită reconstrucția măduvei osoase după chimioterapie. Transplanturile tratează leucemia și limfoamele și pot contribui la refacerea celulelor sanguine afectate de chimioterapie.

Colectarea sângelui din cordonul ombilical - când și cum

Recoltarea se face imediat după naștere, cu permisiunea mamei, și nu prezintă niciun risc, durere sau disconfort pentru mamă sau nou-născut. Părinții, în special mama, oferă consimțământul pentru recoltare. După ce copilul se naște, obstetricianul va tăia cordonul ombilical și sângele va fi colectat, de obicei spontan, prin gravitație, într-o pungă specială sau prin aspirare cu seringă. Colectarea efectivă durează între două și patru minute, iar punga cu sânge este sigilată și etichetată clar pentru identificare.

Metode de colectare

• Metoda gravitațională - sângele curge în pungă cu ajutorul gravitației; se așteaptă oprirea pulsului de la cordon (mai puțin de 5 minute în naștere naturală; peste 15 minute dacă s-au folosit medicamente sau în cezariană).
• Metoda cu seringă - sângele este aspirat cu o seringă după tăierea cordonului; ambele metode trebuie să dureze sub cinci minute.

Transportul către bancă

Punga cu sânge sau kitul de țesut se etichetează și se transportă către laborator în condiții controlate. Transportul probelor biologice se realizează prin firme specializate; temperatura de transport a kitului de țesut din cordonul ombilical este menținută între 4-8°C. Laboratorul trebuie să proceseze proba de sânge în maxim două zile de la recoltare.

Procesarea: de ce este importantă reducerea volumului și eliminarea globulelor roșii

Metoda de procesare superioară a Future Health asigură faptul că pot fi procesate chiar și cantități mici de sânge. Metoda de procesare a sângelui din cordonul ombilical aprobată de industria medicală a celulelor stem utilizată și de Future Health Biobank este prelucrarea prin reducerea volumului și eliminarea celulelor roșii. Pur și simplu, procesul de reducere a volumului implică reducerea dimensiunii probei prin eliminarea deșeurilor nocive, apoi izolarea și protejarea celulelor stem valoroase, pe care le putem utiliza într-un transplant.

Reducerea volumului prin centrifugare

Reducerea prin centrifugare a volumului este cea mai populară metodă. Eșantionul este centrifugat la viteză mare, separând sângele în părțile sale constitutive: celule roșii din sânge, stratul leuco-trombocitar și plasmă. „Produse uzate” se referă la celulele roșii din sânge dintr-o probă de sânge din cordonul ombilical. Acestea nu pot fi criogenate în standarde și se pot sparge eliberând o toxină în probă, ceea ce poate distruge celulele stem valoroase, deci reduce viabilitatea celulară și crește toxicitatea pentru beneficiarul după transplant.

Motive pentru îndepărtarea globulelor roșii

• Celulele roșii din sânge au fost asociate cu efecte secundare dăunătoare sau fatale dacă prea multe dintre ele sunt utilizate în tratament.
• Globulele roșii tind să explodeze în timpul congelării și eliberează fier din hemoglobină, care poate fi toxic.
• Cu cât volumul probei este mai mic, cu atât se va îngheța mai uniform, îmbunătățind calitatea crioprezervării.

Unii preferă alternativa de a îndepărta celulele deteriorate din unitate înainte de criogenare, dar standardul actual al industriei pentru majoritatea băncilor de celule stem este reducerea volumului/separarea celulară și eliminarea plasmei și a globulelor roșii înainte de criogenare.

Adăugarea crioprotectorului și crioprezervarea

Crioprotectorul (de exemplu DMSO) este adăugat la fiecare probă, indiferent de metoda de procesare, pentru a stabiliza și proteja proba în timp ce este criogenată până la aproximativ -180°C. Crioprotectorul este toxic pentru pacient în volume mari, motiv pentru care îndepărtarea volumului inutil și a globulelor roșii reduce riscul de expunere la cantități mari de DMSO la momentul transplantului.

Unitatea de sânge din cordonul ombilical este apoi înghețată și depozitată în criotancuri cu vapori de azot, special concepute pentru unitățile de sânge din cordonul ombilical. Procesul de criogenare al țesutului începe în maternitate; eșantioanele sunt ambalate în pungi speciale sau criotuburi și congelate gradual folosind echipamente de congelare programată care permit scăderea temperaturii cu circa 1°C pe minut, până la temperaturi de depozitare (de ex. -180°C sau -196°C).

Procesarea și stocarea țesutului de cordon ombilical (gelatina Wharton)

După recoltarea sângelui, se prelevează un segment de 15-20 cm din cordonul ombilical pentru a obține țesut bogat în celule stem mezenchimale. Procesarea implică îndepărtarea vaselor de sânge și izolarea gelatinei Wharton, care este maruntită și imersată în plasma autologă (provenită de la același bebeluș). Plasma constituie un mediu nutritiv natural, optim pentru depozitarea țesutului. Unitățile astfel obținute sunt tratate cu crioprotector și eșantionate în criotuburi destinate folosirii independente.

Folosirea plasmei autologe elimină necesitatea mediilor care conțin seruri de origine animală, asigurând un mediu nutritiv care conservă caracteristicile celulelor. Din fragmentele de țesut decongelate pot fi izolate și multiplicate cu succes celule stem mezenchimale, conform rezultatelor obținute în laborator și literaturii de specialitate.

Securitatea în bancă și garanțiile de calitate

Siguranta în bancă presupune luarea tuturor măsurilor pentru protejarea unităților de celule stem: sisteme integrate de monitorizare și alarmare pentru nivelul de azot și temperatura din tancuri, inclusiv alarmare la distanță, existența unui generator electric și echipamente de back-up/UPS, programe de mentenanță și verificări periodice. Pentru a minimiza riscul de contaminare procesarea se desfășoară în camere curate (clean room) prevăzute cu hote cu flux laminar, calitatea aerului este monitorizată, procesarea are loc în sistem închis, se utilizează un sistem triplu de pungi și se efectuează teste de sanitatie periodice de către laboratoare independente.

Unitățile infectate sau incomplet testate sunt carantinate separat de unitățile conforme. Unitatile sunt stocate în sisteme complexe de ambalare: punga de stocare, o punga de protecție și o casetă metalică din aluminiu.

Testare, tipare HLA și eliberarea unității pentru transplant

Unitățile donate sunt supuse screening-ului pentru boli infecțioase și la testare HLA; detaliile sunt înregistrate într-un registru centralizat accesibil centrelor de transplant. Când se găsește o potrivire, centrul de transplant solicită băncii să elibereze unitatea. Acest proces este cunoscut ca transplant de sânge din cordonul ombilical fără legătură și implică taxarea centrului de transplant pentru unitate (taxe tipice între 12.000 și 25.000 USD pe unitate).

Cât sânge este necesar și fezabilitatea transplantului

Aproximativ sunt necesare 20 de milioane de celule nucleate pe kilogram pentru grefarea cu succes a sângelui din cordonul ombilical în timpul transplantului. Probabilitatea de supraviețuire și recuperare după transplant se îmbunătățește cu un număr mai mare de celule stem prezente. Cantitatea necesară depinde de greutatea pacientului, făcând transplantul mai fezabil la copii și pacienți cu greutate corporală mai mică. Deoarece sângele din cordonul ombilical poate avea un număr limitat de celule pentru adulți, s-au dezvoltat strategii precum transplantul dublu de cordon pentru a îmbunătăți recuperarea la pacienții mari.

Avantaje și dezavantaje ale utilizării sângelui de cordon

• Avantaje: incidență și severitate mai scăzute a bolii grefă-versus-gazdă, risc mai mic de contaminare virală, disponibilitate imediată, flexibilitate la potrivirea HLA.
• Dezavantaje: posibil număr insuficient de celule pentru pacienți mari, perioadă de grefă mai lungă (3-4 săptămâni), posibilitate limitată de donații suplimentare din aceeași sursă.

Riscuri și efecte secundare asociate transplantului

Transplanturile implică riscuri: anemie (poate necesita transfuzii), sângerări sau vânătăi din cauza scăderii trombocitelor, risc crescut de infecții în perioada de recuperare din cauza numărului redus de celule albe, precum și boala grefă-versus-gazdă (GVHD) când limfocitele transplantate atacă organismul primitorului. GVHD poate fi acută sau cronică și se tratează cu medicamente imunossupresoare, inclusiv steroizi. De asemenea, exista riscul recidivei bolii inițiale; succesul depinde de stadiul bolii, răspunsul la tratamentele anterioare și alți factori clinici.

Aplicații în medicină regenerativă și cercetare

Sângele și țesutul cordonului ombilical sunt folosite în medicină clasică a celulelor stem și în medicina regenerativă. Celulele stem mezenchimale din țesutul cordonului sunt investigate în peste 500-700 de studii clinice pentru boli vasculare, autoimune și degenerative. Cercetările explorează utilizări în boli neurologice (paralizie cerebrală, encefalopatie ischemică hipoxică), diabet tip 1, regenerare cardiacă post-infarct și multe altele.

Opțiuni de stocare: bancă publică vs bancă privată

Unitățile pot fi donate gratuit băncilor publice sau păstrate în bănci private pentru uz familial. Probabilitatea de a folosi propria unitate pentru un transplant personal este foarte mică; totuși în cazuri familiale cu boli moștenite (de ex. talasemie) o unitate frate compatibil poate fi vitală. Specialiștii în transplant recomandă în general donarea către bănci publice pentru a crește registrul de unități disponibile pentru BMT.

Recomandări practice pentru părinți

• Discutați cu echipa medicală înainte de naștere și semnați consimțământul dacă doriți recoltarea.
• Asigurați-vă că aveți kitul de colectare și instrucțiunile de transport pregătite în bagajul de maternitate.
• Întrebați banca despre metoda de procesare (reducerea volumului/eliminarea globulelor roșii) și condițiile de stocare.
• În cazul donării, înțelegeți procesul de înregistrare HLA și modul în care unitatea poate fi accesată de centrele de transplant.

Tabel: Etapele principale - de la recoltare la transplant

Ce se întâmplă dacă unitatea este utilizată pentru transplant?

Când este identificată o potrivire HLA, centrul de transplant solicită eliberarea unității. Unitățile de calitate sunt deblocate și transportate în condiții speciale pentru transplant. Dacă transplantul este recomandat pentru pacient, medicii vor pregăti recipientul, iar procedura de transplant urmează protocoalele clinice specifice. În anumite cazuri se pot folosi două unități (transplant dublu de cordon) pentru pacienți adulți sau pentru a crește numărul total de celule nucleate disponibile.

Întrebări frecvente și informații finale

Recoltarea și păstrarea sângelui din cordonul ombilical este o procedură simplă, nedureroasă, care poate avea aplicații vitale. Celulele stem tinere recoltate la naștere nu au suferit leziuni ale ADN-ului și au un potențial crescut de regenerare. În cazul în care articolul nu a acoperit complet un aspect care vă interesează, este recomandat să cereți informații suplimentare sau să programați o întâlnire cu specialiști pentru discuții detaliate privind opțiunile terapeutice și pașii următori.

tags: #procedura #prelucrare #sange #din #cordon #ombilical

Postări populare:

• BeBe dacă nu mă pupi: versuri și semnificații ale unui text-colorat — analiză tematică
• Oligobs Prenatal Omega 3: utilizare în ultimul trimestru și în perioada alăptării
• Zgomot la cap în sarcină: cauze, simptome și cum să gestionezi
• Despre Secția de Pediatrie a Spitalului Județean de Urgență Bacău
• Sechele tardive după chiuretaj: efecte pe termen lung și riscuri