Se inoculează 0,1-0,2 ml din supernatantul clarificat în cavitatea alantoidiană de la cel puţin 4 ouă embrionate de găină puse la incubat timp de 8-10 zile. Ouăle inoculate sunt incubate la temperatura de 37°C şi se efectuează zilnic mirajul. Pe măsură ce embrionii mor, ouăle conţinând embrioni morţi sau muribunzi, precum şi toate ouăle rămase după 6 zile de la inoculare vor fi refrigerate la temperatura de 4°C şi vor face obiectul depistărilor hemaglutininei, plecându-se de la lichidul alantoidian/amniotic. Ouăle ideal provin de la o fermă liberă de germeni patogeni specifici, însă în lipsa acestei posibilităţi se poate utiliza un efectiv recunoscut liber de anticorpi contra influenţei aviare. Testarea genetică a embrionilor în ziua 5-6 de dezvoltare (stadiul de blastocist) este o procedură esențială pentru cuplurile care doresc o evaluare genetică complexă înainte de transferul embrionar. 1. 2. 3.

În cazurile în care este necesară testarea unei boli monogenice (PGT-M), se recomandă realizarea testării PGT-A din acelaşi set de celule recoltate în timpul biopsiei. Rezultatul reflectă doar celulele biopsiate, nu întregul embrion. PGT în FIV este o testare genetică a embrionilor folosită în anumite situații pentru a identifica anomalii cromozomiale sau boli genetice specifice înainte de transfer. PGT înseamnă preimplantation genetic testing. Testarea se realizează după obținerea embrionilor în laborator, de obicei în stadiul de blastocist. PGT în FIV nu este un test de rutină pentru toate cuplurile. PGT poate oferi informații utile, dar are limite clare. Testarea poate identifica anumite anomalii cromozomiale sau mutații genetice specifice pentru care a fost planificată. Una dintre cele mai importante limite este faptul că testarea se face pe câteva celule, nu pe întreg embrionul. Din acest motiv, rezultatul poate fi influențat de mosaicism sau de erori tehnice de laborator. PGT implică și costuri biologice și logistice suplimentare: este nevoie de proceduri de laborator avansate, de congelarea embrionilor și de timp până la obținerea rezultatului. Trebuie înțeles și faptul că PGT nu crește automat șansele de sarcină pentru orice pacientă. În unele situații poate ajuta la selectarea unui embrion potrivit pentru transfer, dar în alte cazuri beneficiul este limitat sau insuficient demonstrat. Consilierea genetică este esențială înainte de PGT. Medicul genetician explică ce tip de risc există în familie, ce variantă de test este adecvată și ce rezultat poate fi așteptat.

Tipuri și scopuri ale testării genetice preimplantare

  • PGT-A: screening genetic preimplantare pentru numărul anormal de cromozomi. Analizează celulele embrionare pentru a determina excesul sau lipsa cromozomilor, ceea ce poate afecta implantarea și dezvoltarea ulterioară a sarcinii.
  • PGT-M: testare genetică preimplantare pentru boala monogenică. Analizează mutațiile specifice ale genelor, pe care se știe că unul dintre părinți (sau ambii) le poartă, cum ar fi fibroza chistică sau BRCA1/BRCA2, printre altele.
  • PGT-SR: rearanjarea structurală a cromozomilor (inversii, translocații). Analizează embrionii cu privire la structura cromozomială pentru a evalua dacă materialul genetic este în cantitatea corectă.

Majoritatea programelor de PGT includ tot trei etape: biopsia embrionului; analiza biopsiei. Biopsia este realizată în stadii avansate ale dezvoltării și expiră un număr suficient de celule pentru analiză. Embrionul este în continuă formare în primele săptămâni de la concepție, iar extragerea celulelor trebuie făcută astfel încât să nu-l deterioreze. Experții specifică că bioptia embrionară laser necesită echipamente costisitoare, de înaltă precizie, însă oferă informații genetice esențiale fără a afecta dezvoltarea embrionului.

Avantajele și limitele testării preimplantare

  • Concordanța între rezultatele obținute prin testarea mediului de cultură (Embrace) față de biopsia embrionară laser în diagnosticul genetic preimplantamental al aneuploidiilor (PGT-A) poate fi redusă, cu rare potriviri între mediu și biopsie.
  • Utilizarea mediului de cultură embrionar poate introduce ADN matern în probe, crescând riscul de mozaic fals pozitiv/fals negativ.
  • Biopsia embrionară reprezintă cea mai înaltă calificare tehnică a embriologului, dar poate implica riscuri de deteriorare dacă este efectuată incorect.
  • Condițiile de laborator, timpul până la raportul final și costurile suplimentare pot afecta decizia de utilizare a PGT.

PGT nu garantează o sarcină cu succes: embrionii cu rezultate PGT normale pot să nu se implantă sau pot duce la avort spontan. Rata sarcinilor prin transferul de embrioni genetici normali (euploizi) este estimată în jur de 65-70%. Riscurile asociate includ erori tehnice, mosaicism și necesitatea de a reconfirmări cu teste prenatale ulterioare.

Asigurarea calității și consilierea

  • Conservarea embrionilor pentru rezultate definitive este crucială pentru planificarea transferului.
  • Consilierea genetică este esențială înainte de PGT, pentru a explica riscurile, tipurile de teste și rezultatele posibile.

Întrebări frecvente despre testarea genetică a embrionilor

  • Ce este PGT-A, PGT-M, PGT-SR și cum diferă fiecare?
  • Este PGT util pentru toate cuplurile? Nu, este recomandat în contexte specifice, cum ar fi vârsta înaintată a mamei, istoric de avorturi spontane sau prezența unor boli monogenice în familie.
  • Care sunt avantajele PGT în comparație cu testarea prenatală ulterioră? PGT reduce riscul de transmitere a unor anomalii cromozomiale înainte de implantare, însă rezultatele nu sunt absolute și pot necesita teste prenatale ulterioare.
  • Ce risc prezintă recoltarea/biopsia embrionară? Riscul de deteriorare a embrionului este mic, dar existent, și depinde de competența echipei medicale și de tehnologia folosită.

Ce se întâmplă după biopsie și cum se gestionează rezultatele

După recoltarea celulelor pentru analiză, embrionul este păstrat în siguranță până la obținerea rezultatului genetic. Dacă rezultatele sunt favorabile, embrionul poate fi pregătit pentru transfer, iar uterul mamei este condiționat pentru susținerea sarcinii. În cazul testelor negative, se poate recomanda repetarea ciclului sau alegerea altui embrion potențial pentru transfer. Tehnologia actuală a PGT reprezintă una dintre cele mai importante evoluții din medicina reproductivă modernă, dar rămâne orientată pe selecția embrionilor cu potențial ridicat de implantare și pe informarea cuplurilor despre riscuri și limite.

Grafic: fluxul procesului PGT de la biopsie la transfer

Testarea genetică preimplantare poate orienta deciziile clinice în funcție de profilul genetic al embrionilor, dar nu elimină complet riscul de complicații sau de eșec al implantării. Întrebările despre alternativele la PGT includ testări prenatale neinvazive (NIPT), prelevare de vilozități coriale (CVS) și amniocenteză, care pot oferi informații după instalarea sarcinii, dar cu niveluri diferite de acuratețe și riscuri.

Biopsie embrionară pentru testare genetică preimplantatorie (PGT) | Laboratorul de Embriologie FIV din Boston

Condiții și reglementări relevante în industrie

Reglementările privind testarea genetică a embrionilor în industria aviară se bazează pe reglementări stricte referitoare la securitatea alimentelor, bunăstarea animalelor și controlul bolilor. Planurile de eradicare a bolilor au componente financiare, proceduri de monitorizare, precum și cerințe de notificare și colaborare între statele membre pentru combaterea rapidă a focarelor. De asemenea, reglementările includ măsuri de testare, transport, carantină și garantarea izolării unităților afectate, cu scopul de a proteja atât oamenii, cât și animalele și produsele alimentare.

tags: #testare #embrioni #pe #alimente

Postări populare: