Daca te pregatesti pentru o procedura de fertilizare in vitro (FIV), iata ce se intampla in laborator si cum urmeaza sa aiba loc dezvoltarea embrionului inainte de transfer si pana in ziua a zecea.
Înainte de procedura propriu-zisa de FIV, un cuplu aspirant trece prin diagnosticare corecta si completa, stimulare ovariana (la FIV cu ovocite proprii), punctie ovariana si recoltare de sperma pentru pregatirea ei in laborator.
Prin punctia ovariana, medicul specialist recupereaza ovocitele mature pe care le va supune procesului de fertilizare in vitro.
Putem opta si pentru FIV pe ciclu natural, dupa caz.
Ovocitele aspirate au trei morfologii principale diferite, respectiv: profaza I - vezicula germinala (GV) este prezenta; metafaza I - primul corp polar nu a fost extrudat si nu exista nici GV; metafaza II - primul corp polar este prezent.
Ovocitele sunt inseminate dupa o perioada cuprinsa intre trei si 20 de ore dupa recoltare.
Exista diferite metode de prelucrare a spermatozoizilor pentru fertilizarea in vitro. Tehnica cea mai cunoscuta este swim-up.
Aceasta presupune amestecarea unei parti din lichidul ejaculat cu un mediu de cultura, centrifugarea, indepartarea supernatantului care contine plasma seminala si suprapunerea unei culturi proaspete pe peletul care contine spermatozoizii.
In timpul incubarii ulterioare a peletelui, timp de 30-60 de minute, sperma motila migreaza in mediul suprapus.
Mediul care contine acesti spermatozoizi este apoi colectat prin aspiratie cu o pipeta si folosit pentru inseminarea ovocitului.
Scopul acestei proceduri este:sa elimine plasma seminala, care inhiba fertilizarea;sa concentreze sperma motila;sa elimine detritusurile si celulele contaminate.
De obicei, sperma motila se adauga ovocitelor la o concentratie de 100 000 de spermatozoizi per mililitru.
Ovocitul are doua suprafete care trebuie sa fie patrunse de spermatozoizi: zona pellucida si membrana plasmatica.
Zona pellucida protejeaza ovocitul si opreste spermatozoizii suplimentari sa intre in ovocit dupa ce un spermatozoid a patruns in el. Membrana plasmatica este a doua suprafata.
Un corp polar este un material genetic suplimentar pe care ovocitul il elimina inainte de fertilizare. Un corp polar este un semn al maturitatii ovocitelor. Un al doilea corp polar este eliminat dupa fertilizare.
Ovocitele sunt inseminate folosind tehnici conventionale de inseminare in vitro sau injectie intracitoplasmatica de sperma (ICSI), despre care puteti citi si in Infertilitate masculina: ce nu trebuie sa faci daca vrei copii I Despre FIV cu ICSI.
Inseminarea conventionala (de rutina) in vitro este incubarea ovocitelor si a spermei peste noapte.
ICSI injecteaza un singur spermatozoid viu intr-un ovocit matur. ICSI este necesar pentru cuplurile care nu au rate de fertilizare sau foarte scazute in timpul altor cicluri.
Poate fi necesar si atunci cand numarul de spermatozoizi mobili normali este mai mic decat cel necesar pentru FIV de rutina.
Iti explicam in imaginea de mai jos ce se intampla in laborator, in prima faza a procesului FIV.
Aceasta etapa are loc imediat dupa fertilizare, inainte ca gametii sa fuzioneze si este vizibila pe o perioada scurta de timp, la 18-22 de ore dupa fertilizare. Zigotul prezinta doua corpuri polare, pronuclee masculin si feminin, inainte de fuziunea lor. Aceste doua pronuclee contin ADN-ul de la fiecare parinte care se vor uni pentru a forma un nou individ. Zona pellucida este inca prezenta.
In etapa urmatoare, se dezvolta embrionul unicelular - zigotul - cu cele doua pronuclee fuzionate intr-o substanta genetica.
Embrionul bicelular (1-2 zile) se formeaza, de obicei, la aproximativ 26 de ore de la unirea spermatozoidului cu ovulul. Embrionul cu patru celule (ziua 2) se dezvolta in aproximativ 48 de ore dupa inseminare. In timpul fiecarei divizie mitotica, embrionul nu creste ca dimensiune si divide citoplasma existenta.
In ziua a treia, la aproximativ 72 de ore dupa inseminare, embrionul uman se afla in stadiul de opt celule. Dintre acestea, sase sunt vizibile in acest plan focal. Mai multe despre transferul embrionului in ziua 5 poti citi aici.
Conditii pentru dezvoltarea embrionului: Potrivit specialistilor de la Dacia Medical Center, in dezvoltarea embrionului sunt necesari o serie de parametri pentru a asigura calitatea acestuia. Parametrii sunt:numarul de celule;rata de dezvoltare;procentul de fragmentare.
In tabelul de mai jos, iti prezentam scorul pe care trebuie sa il obtina cel mai bun embrion, aflat in ziua a treia de dezvoltare. Scorul a fost sugerat de Michael J. Tucker din cadrul FIBiol HCLD Georgia Reproductive Specialists, Atlanta, Statele Unite ale Americii.
In figura de mai jos, pot fi observate cele cinci stadii de dezvoltare a embrionului in cadrul procedurii de fertilizare in vitro.
Dezvoltarea embrionului: morula
Pe masura ce un ovul uman fertilizat se divide, mai intai devine o „minge” solida de celule, denumita stiintific morula. Aceasta apare la aproximativ 96 de ore de la inseminare. Dimensiunea totala a embrionului continua sa fie aproape la fel ca embrionul unicelular. Acest termen se aplica pana ce incepe sa se formeze o cavitate in interiorul grupurilor de celule cu forma sferica.
The inner cells (IN) are round and will become the fetus = celulele interioare sunt rotunde si se transforme in fetus
The outer (OUT) cells (trophoblasts) are flat = celulele exterioare (OUT) (trofoblaste) sunt plate si se transforma in placenta
Dezvoltarea embrionului: blastocistul
Odata ce morula se dezvolta ca o cavitate interioara, in ziua a cincea, embrionul a atins un nou punct de reper in dezvoltare, respectiv faza de blastocist. Celulele mucoasei polului embrionar, numite trofoblast, vor aduce apa, minerale si aminoacizi din mediul bogat in substante nutritive din afara embrionului, in cavitatea blastocistului, unde pot ajunge la celulele masei celulare interioare.
Punctajul pentru calitatea blastocistului: Specialistii de la Shady Grove Fertility Center, Rockville si Georgia Reproductive Specialists au stabilit un sistem de notare pentru modificarile inregistrate de blastocist si calitatea acestuia. Astfel, fiecarui blastocist i se poate atribui un scor numeric total, pe baza nivelului de dezvoltare si a gradului de extindere.
Punctajul acordat poate fi: BINE (1) - cand blastocistul este complet extins sau in incubatie; evaluarea are loc in ziua a 5-a; ADECVAT (2) - blastocistul este complet extins sau in incubatie: ziua a 6-a; expansiune moderata: ziua a 5-a; MEDIOCRU (3) - expansiune moderata: ziua a 5-a; cavitatie precoce: ziua a 5-a; SLAB (4) - morula: ziua a 5-a; cavitatie precoce: ziua a 6-a.
Acestea li adauga doua scoruri alfabetice pentru clasificare, respectiv: primul: masa celulelor interioare al doilea: trofectodermul este un strat de celule pe marginea exterioara a unui blastocist. Trofectodermul incepe sa se formeze in jurul celei de-a 5-a zi dupa ce un ovul este fertilizat, in acelasi timp cu restul blastocistului.
Exemplul 1: Un blastocist de buna calitate, bine extins in a 6-a zi, cu numar bun de celule in ICM (> 12 si pana la 15) si buna integritate a trofectodermului ar fi notate ca 2AA.
Exemplul 2: Un blastocist expandat complet in a 5-a zi cu un trofectoderm frumos, dar ICM inexistente ar fi notat cu 1CA.
Un alt sistem de notare al blastocistului: Gardner si colaboratorii in „Fertilitate si sterilitate” 73: 1155-1158, 2000.
Obiectivul studiului amintit a fost de a determina relatia dintre scorul blastocistului si rezultatul sarcinii, avand la dispozitie 107 pacienti supusi culturii de blastocist si transferul a doi embrioni de ziua a cincea. Rezultat. Atunci cand o pacienta a primit doi blastocisti de top (64% dintre pacienti), ratele de implantare si sarcini au fost de 70% si, respectiv, 87%. Cand doar un singur blastocist de calitate superioara era disponibil pentru transfer (21% dintre pacienti), ratele de implantare si sarcina au fost de 50% si 70%. In schimb, cand numai blastocisti cu scoruri scazute erau disponibili pentru transfer (15% dintre pacienti), ratele de implantare si sarcina au fost de 28% si 44%. Nu au fost observati gemeni monozigoti la acest grup de pacienti. In concluzie, capacitatea de a transfera un blastocist cu scor mare ar trebui sa conduca la rate de sarcina mai mari de 60%, fara complicatiile date de sarcina gemelara.
tags: #stadiu #de #dezvoltare #a #zigotului #luo